临床应用

Clinical application

PCR在艾滋病检测过程中的临床应用
作者:博日科技 时间:2018-07-25 10:34:49 浏览数:2018

艾滋病是由艾滋病病毒(HIV)感染引发的一种危害极大的传染病,HIV感染人体后一般会迅速找到靶细胞(主要是CD4细胞)并开始大量复制。在急性感染期,感染者体内每立方毫米血液即可检测到数万甚至数十万的病毒拷贝。

艾滋病的预防和控制,尽早确诊HIV感染是关键,可靠及时的HIV检测技术这时候就显得尤为重要。近年来,随着生物检测技术的发展,HIV的检测技术也取得了长足进步。HIV感染者确诊所需要的时间大大缩短,检测的可靠性和可操作性大大得到了提高。现在的HIV检测技术,可分为HIV抗体检测和非HIV抗体检测。

酶联免疫吸附法(ELISA)

ELISA是检测HIV的一种固相免疫测定技术,需要先将抗体或抗原包被到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。目前为止,ELISA试剂已经发展到第四代,也就是人们现在所说的抗原抗体联合检测试剂。使用第四代检测试剂检测,HIV感染确诊窗口期可缩短到4~6周。ELISA检测的特点是快速可靠,是目前最常用的HIV筛查方法。

免疫荧光法(IFA)

一种比较早也比较可靠的生物检测技术。其特点是操作简便,敏感性及特异性要比ELISA法高,缺陷是IFA对某些血清非特异性荧光难以去除,仪器价格昂贵,结果判断主观性强。

明胶颗粒凝集试验(PA)

PA是一种快速、简便的HIV血清抗体检测方法,此方法操作简单,无需特殊仪器设备,适合对少量样本的检测,但灵敏度和准确度不如ELISA法。

金标快速反应试验(SPOT)

免疫金标记技术用于快速检测HIV抗体。特点:出结果快,特异性好,快速简便,适用于应急检测以及边远地区检测。

免疫层析/渗滤实验

属于金标法的一种,是近年迅速发展起来检测方法。特点是特异性好,敏感度也较高,适宜于偏远地区临床用血检测。

无创性HIV抗体检测

无创性HIV抗体检测适用人体体液来检测HIV,这些体液的收集避免静脉穿刺,优点是标本来源是无创的,易被接受,尤其是采血困难的人群,缺点是不适合大量样品的同时检测。

HIV感染人体后,人体免疫系统需要经过一段时间的免疫应答才能逐渐产生足量抗体,所以在理论上HIV抗体检测是“滞后的”。

核酸检测

众所周知,艾滋病患者有个感染窗口期,一般在4周-6周左右,也就是说,感染初期,一部分的人由于血液中病毒数量较少,传统临床的检测手段暂时未能检测出病毒,出现假阴性的可能性。

随着生物技术的发展,HIV核酸检测手段逐渐得到了人们的认可。

核酸检测可以直接检测HIV RNA,可在发现血清抗体阳转之前检测到HIV感染,而且比P24抗原检测方法更灵敏。目前最新的超灵敏HIV核酸检测技术已经将HIV检测窗口期缩短至3~7天。

HIV核酸检测通常使用PCR和RT-PCR技术,可分为定性检测和定量检测两大类。其特点是可靠灵敏,窗口期大大缩短。缺点是成本较高,难以大范围免费推广。

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